醋蒸对南五味子木脂素类成分在大鼠体内药代动力学的影响(2)
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五味子药材产地为陕西省南郑县,经陕西中医学院生药教研室王继涛高级实验师鉴定为木兰科植物华中五味子Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.的干燥成熟果实；五味子酯甲和五味子甲素对照品(购于中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号分别为11529-200503、110764-200609)；乌来糖(国药集团化学试剂有限公司,批号WS20050411)；甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
SD大鼠,7～8周龄,雌雄各半,清洁级,体质量(220±20)g,购自西安交通大学动物实验中心(动物合格证号：2007-01)。
2方法与结果
2.1样品的制备
分别精密称取南五味子炮制前后样品粉末(过60目筛)各约1 kg[5],用16倍量55%乙醇提取2次,每次60 min,滤过,提取液在60 ℃水浴减压浓缩,回收溶媒至干[7]。经检测,南五味子炮制前干膏样品五味子酯甲含量为0.832%,五味子甲素含量为0.929 8%；炮制后干膏样品五味子酯甲含量为0.895 1%,五味子甲素含量为0.990 3%(均以原药材量进行计算)。提取物于4 ℃冷藏待用。
2.2对照品溶液的制备
精密称定5.64 mg五味子酯甲、6.08 mg五味子甲素,分别置于25 mL量瓶中,加95%乙醇使溶解,定容至刻度,五味子酯甲和五味子甲素对照品溶液浓度分别为225.6、243.2 最/mL。4 ℃冷藏待用。
2.3生物样品的处理
精密量取1.0 mL血浆,置于5 mL离心管中,加入0.1 mL三氯乙酸,涡旋1 min,加入2 mL乙醚,涡旋1 min,超声1 min,3500 r/min离心10 min,取上清液(乙醚层)。按照上述程序,以乙醚萃取3次。合并3次乙醚萃取液,以氮气流于37 ℃吹干,残渣加0.2 mL甲醇,涡旋1 min,超声3 min,10 000 r/min离心10 min,取上清液10 μL进样作高效液相色谱(HPLC)分析 ......
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