离子液体分散液相微萃取—HPLC测定葛根中葛根素、大豆苷和大豆苷元含量(2)
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[Omim][PF6],纯度97%),上海成捷化学有限公司;甲醇、乙醇、冰醋酸均为分析纯,重庆川东化工有限公司化学试剂厂;磷酸,分析纯,成都市科龙化工试剂厂;二次蒸馏水,实验室自制。葛根饮片购自当地药房,经西南大学周光明教授鉴定为豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
分别精密称取葛根素、大豆苷、大豆苷元对照品,甲醇超声溶解,配制成葛根素2340 μg/mL、大豆苷2040 μg/mL、大豆苷元2100 μg/mL的对照品母液。再分别准确吸取3种对照品母液适量,用流动相配制成一系列不同浓度的混合对照品溶液,0.45 μm有机滤膜过滤,4 ℃冰箱保存备用。
2.2 供试品溶液的制备和分散液相微萃取操作方法
称取0.10 g葛根样品,用纯水对样品其进行超声处理(150 W,40 kHz)30 min,制备成供试品溶液,经0.45 μm有机滤膜过滤,4 ℃冰箱保存备用。
移取5 mL供试品溶液至5 mL带塞的尖底离心试管中,快速注入300 μL[Hmim][PF6]萃取剂和0.5 mL甲醇分散剂,涡漩混合1 min,混合溶液充分振荡后形成水/分散剂/[Hmim][PF6]的乳浊液体系,于室温静置2 min,再以3500 r/min离心5 min。在离心管底部形成萃取剂液滴聚集相。用微量进样器抽取聚集相液滴至2 mL尖底塑料离心管,用甲醇溶解并定容至1 mL,取20 μL进行HPLC分析。
2.3 色谱条件
色谱柱:Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-0 ......
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