不同生长年限黄芪中黄芪甲苷和多糖含量比较(2)
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2.2 黄芪多糖含量测定
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100 mg,置100 mL容量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为1 mg/mL的葡萄糖对照品溶液。
2.2.2 苯酚液的配制 取苯酚100 g,加铝片0.1 g 和碳酸氢钠0.05 g,常温蒸馏,收集182 ℃馏分。所得新馏苯酚用水配成5%苯酚水溶液(棕色瓶保存)。
2.2.3 最大吸收波长的选择 精密吸取葡萄糖对照品溶液60 μL,置于10 mL具塞试管中,加水定容至2 mL,另取2.0 mL蒸馏水作空白对照,精密加入1 mL苯酚液,摇匀,迅速加入5 mL浓硫酸,静置5 min,置沸水浴中反应15 min后取出并放至室温,于紫外分光光度计波长400~600 nm范围内扫描,测得最大吸收波长为490 nm。
2.2.4 线性关系考察 精密吸取葡萄糖对照品溶液10 mL,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀。分别精密吸取稀释后的葡萄糖对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL,置于10 mL具塞试管中 ......
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