左归降糖益肾方对MKR糖尿病肾病小鼠足细胞葡萄糖调节蛋白78、C/EBP同源蛋白表达的影响(2)
2.3 观察指标2.3.1 生化指标检测 灌胃前1 d及灌胃4周后,各组小鼠禁食不禁水5 h,尾静脉采血,电化学法血糖仪检测FBG;留取随机尿,采用ELISA检测尿微量白蛋白(UmAlb)。
2.3.2 肾组织透射电镜观察 取约1 mm3大小肾皮质用于电镜观察。
2.3.3 RT-PCR法检测肾小球足细胞葡萄糖调节蛋白、C/EBP同源蛋白基因的表达 取20 mg肾皮质,按总RAN提取试剂盒操作步骤提取RNA,核酸蛋白分析仪检测RNA浓度。取1 μg总RNA合成cDNA。引物:GAPDH(500 bp)上游5'-GCTCACTTGAAGGGTGG-3';下游5'-CCATTCGTTGTCGTACCA-3';GRP78(399 bp)上游5'- CTGGGTACAATTTGATCTGACTGG;下游5'-GCATCCTGGTGG CTTTCCAGCCATTC-3';CHOP(217 bp)上游5'-CACCTA TATCTCATCCCCAGGA-3';下游5'-ACCACTCTGTTTCCGTTT CCTA-3' ......
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