大孔树脂纯化肺形草总黄酮工艺研究(2)
2.4 上样液流速的确定取4份各30 mL预处理的AB-8大孔树脂装柱,将浓度为5.285 mg/mL的样品溶液分别以1、2、3、4 BV/h的不同流速通过树脂柱进行动态吸附,考察不同流速时总黄酮的吸附率,结果吸附率分别为93.84%、91.39%、87.13%、78.67%。可以看出,吸附率随流速增大而下降。当流速在1~2 BV/h时下降趋势小,当流速为3 BV/h时下降趋势明显。一般来说,被吸附物质通过树脂柱越慢,越能和树脂充分接触,从而更好地被吸附,综合考虑工作效率和吸附效果,选择上样流速为2 BV/h。
2.5 上样量的确定
取30 mL预处理的AB-8大孔树脂装柱,取浓度为5.285 mg/mL样品溶液160 mL以2 BV/h流速上样, 10 mL/瓶收集流出液,测定每瓶流出液中总黄酮的含量,以总黄酮含量为纵坐标,以瓶号为横坐标,绘制泄漏曲线,见图1。结果显示,第10瓶时开始有泄漏,因此确定上样量以100 mL为宜,根据提取中总黄酮的含量可知最佳上样量为17.62 mg/mL树脂。
2.6 绘制洗脱曲线
取30 mL预处理的AB-8大孔树脂装柱,将浓度为5.285 mg/mL样品溶液加入大孔吸附树脂柱中 ......
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