耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4表达的影响(2)
1.2 药物耳聋左慈丸汤剂(熟地黄24 g,山萸肉12 g,山药12 g,茯苓9 g,泽泻9 g,牡丹皮9 g,柴胡3 g,磁石3 g),饮片购于辽宁中医药大学附属医院。氢化可的松注射液,天津金耀氨基酸有限公司,批号20130522。
1.3 主要试剂与仪器
SABC试剂盒(抗兔)、DAB显色液(北京鼎国试剂有限公司),亲和纯化兔抗鼠AQP4多克隆抗体(Proteintech)。动物颅骨钻(成都泰盟科技有限公司),FSH-Ⅱ型高速电动匀浆器(江苏金坛市环宇科学技术仪器厂),PoMini-Protein Ⅲ垂直板电泳装置(美国BIO-RAD),解剖显微镜(日本OLYMPUS 322598), werPac200电泳仪(美国BIO-RAD)。
1.4 分组与造模
随机抽取50只小鼠,参照文献[4]方法造模。小鼠每日按0.5 mg/只剂量腹腔注射氢化可的松,共9 d。之后进行听力测试:注射10%水合氯醛麻醉,置于隔声屏蔽室内,应用脑干诱发电位仪(丹麦)进行检测。每只小鼠分别测试双耳ABR反应阈 ......
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