健脾活骨方不同提取部位对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响(3)
2.8 油红O染色
细胞成脂诱导第14日时进行油红O染色。弃培养基,PBS冲洗2遍,4%多聚甲醛固定15 min,PBS冲洗2遍,加入油红O染色液,避光反应10 min,镜下观察并采集图像。100%异丙醇在37 ℃洗脱15 min,595 nm处检测其OD值。
3 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件进行分析。实验数据以—x±s表示,组间计量资料比较采用方差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。
4 结果
4.1 健脾活骨方不同提取部位对骨髓间充质干细胞增殖的影响
JPHGF 4种不同提取部位(水、氯仿、正丁醇和乙酸乙酯部位)对BMSCs的增殖均有显著的促进作用,表现为OD值显著增高,其中水和氯仿部位在10-6~10-2 mg/mL范围内,呈明显浓度依赖性(P<0.05,P<0.01,P<0.001);而正丁醇部位在10-6~10-4 mg/mL范围内,浓度依赖性较好,随浓度增加,促增殖作用有所下降;乙酸乙酯部位的在10-6~10-2 mg/mL范围内,量效关系不明显。为比较各种提取物对BMSCs的效应,选择10-6~10-4 mg/mL范围作为观察浓度,结果见图1。
注:con为对照组;与con比较 ......
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细胞成脂诱导第14日时进行油红O染色。弃培养基,PBS冲洗2遍,4%多聚甲醛固定15 min,PBS冲洗2遍,加入油红O染色液,避光反应10 min,镜下观察并采集图像。100%异丙醇在37 ℃洗脱15 min,595 nm处检测其OD值。
3 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件进行分析。实验数据以—x±s表示,组间计量资料比较采用方差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。
4 结果
4.1 健脾活骨方不同提取部位对骨髓间充质干细胞增殖的影响
JPHGF 4种不同提取部位(水、氯仿、正丁醇和乙酸乙酯部位)对BMSCs的增殖均有显著的促进作用,表现为OD值显著增高,其中水和氯仿部位在10-6~10-2 mg/mL范围内,呈明显浓度依赖性(P<0.05,P<0.01,P<0.001);而正丁醇部位在10-6~10-4 mg/mL范围内,浓度依赖性较好,随浓度增加,促增殖作用有所下降;乙酸乙酯部位的在10-6~10-2 mg/mL范围内,量效关系不明显。为比较各种提取物对BMSCs的效应,选择10-6~10-4 mg/mL范围作为观察浓度,结果见图1。
注:con为对照组;与con比较 ......
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