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编号:12581096
补肾中药对肾虚质大鼠脑源性神经营养因子表达的影响(2)
http://www.100md.com 2015年10月1日 中国中医药信息2015年第10期
     1 实验材料

    1.1 动物

    8周龄清洁级SD雌、雄大鼠,体质量200~240 g,西安交通大学医学院实验动物中心,许可证号SCXK(陕)2007-001。标准饲料喂食,不限饮水,室温。雌雄土猫各1只,3月龄,凶狠善叫,鲜活大鼠喂食,不限饮水,室温。

    1.2 主要药物、试剂及仪器

    左归丸(批号100306)、右归丸(批号110309),河南省宛西制药股份有限公司;枸橼酸缓冲液、水合氯醛、4%多聚甲醛、30%蔗糖溶液、30%H2O2(实验室自制),DAB显色试剂盒、SABC试剂盒、OCT包埋剂、BDNF一抗、二抗,武汉博士德生物技术公司;精密天平(美国赛多利斯),冰冻切片机(Leica CM 1850)。

    2 实验方法

    2.1 分组及造模

    适应性饲养1周后,按雄性与雌性大鼠1∶2比例合笼交配。成功受孕后将孕母鼠随机分为对照组和肾虚组各10只。肾虚组孕鼠置于特制鼠笼,于8:00-19:00置于猫笼旁进行恐吓,同时在猫笼内放置雄鼠令其捕食,使孕鼠在旁处于恐慌状态;对照组孕鼠不作刺激处理。非恐吓时间2组均置于同处并确保其他非处理因素一致[1]。恐吓至2组孕鼠产子,将仔鼠饲养4周后进行分组。肾虚组孕鼠所产仔鼠随机选取30只,分为模型组、左归丸组、右归丸组各10只,继续对3组仔鼠进行“猫吓鼠”方案,持续1个月。空白组仔鼠10只从对照组孕鼠所产仔鼠中随机选取,零刺激,非恐吓时间4组仔鼠均置于同处减小非处理因素 ......
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