苓甘五味姜辛汤对哮喘大鼠环腺苷酸、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A及水通道蛋白5的影响(2)
1.3 主要试剂与仪器
cAMP、PKA及AQP5 ELISA试剂盒,达科维生物技术有限公司。Benchmark Plus连续波长酶仪(美国Bio-rad),高速冷冻离心机(Biofuge-Stratos)。
2 实验方法
2.1 分组与造模
适应性饲养1周后,采用随机数字表法将90只大鼠按体质量分为空白组、模型组、地塞米松组及苓甘五味姜辛汤低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组),每组15只。大鼠哮喘模型制备参照文献[1-3]方法,即在第1、8日分别腹腔注射0.5 mL含100 mg卵蛋白和100 mg氢氧化铝凝胶的PBS致敏,然后在第15~29日雾化吸入含1%OVA的PBS激发20 min,每日1次;地塞米松干预组于激发前30 min予地塞米松1.0 mg/kg腹腔注射,其余操作同模型组;空白组以PBS代替OVA致敏和雾化吸入激发。除空白组外,其余大鼠日常饮用冰水,并在激发期间将大鼠置于(0±4)℃的冷风中4 h/d,且每日让大鼠在(10±2)℃水中游泳30 min,使大鼠外感于寒,内伤于阳,从而使肺阳虚衰,宣降失常,寒饮内停于肺。造模结束时中药中剂量组死亡2只,中药低剂量组及地塞米松组各死亡1只,故检测时每组统一选取12只。
2.2 给药
大鼠给药剂量按人与大鼠之间体表面积折算[4]等效量为4 g/kg,大剂量为2倍等效量,小剂量为1/2等效量 ......
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cAMP、PKA及AQP5 ELISA试剂盒,达科维生物技术有限公司。Benchmark Plus连续波长酶仪(美国Bio-rad),高速冷冻离心机(Biofuge-Stratos)。
2 实验方法
2.1 分组与造模
适应性饲养1周后,采用随机数字表法将90只大鼠按体质量分为空白组、模型组、地塞米松组及苓甘五味姜辛汤低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组),每组15只。大鼠哮喘模型制备参照文献[1-3]方法,即在第1、8日分别腹腔注射0.5 mL含100 mg卵蛋白和100 mg氢氧化铝凝胶的PBS致敏,然后在第15~29日雾化吸入含1%OVA的PBS激发20 min,每日1次;地塞米松干预组于激发前30 min予地塞米松1.0 mg/kg腹腔注射,其余操作同模型组;空白组以PBS代替OVA致敏和雾化吸入激发。除空白组外,其余大鼠日常饮用冰水,并在激发期间将大鼠置于(0±4)℃的冷风中4 h/d,且每日让大鼠在(10±2)℃水中游泳30 min,使大鼠外感于寒,内伤于阳,从而使肺阳虚衰,宣降失常,寒饮内停于肺。造模结束时中药中剂量组死亡2只,中药低剂量组及地塞米松组各死亡1只,故检测时每组统一选取12只。
2.2 给药
大鼠给药剂量按人与大鼠之间体表面积折算[4]等效量为4 g/kg,大剂量为2倍等效量,小剂量为1/2等效量 ......
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