白疕合剂对体外培养人永生化角质形成细胞分泌血管内皮生长因子及其受体2表达的影响(2)
2 实验方法
2.1 分组、给药及药物血清制备
实验大鼠随机分为空白血清组、阿维A组和白疕合剂低、中、高剂量组,每组10只,并单设空白对照组。白疕合剂用药量,成人100 mL/(70 kg·d),按照人与大鼠体表面积比例进行换算,得出大鼠给药剂量为0.9 mL/(100 g·d),以此浓度设为白疕合剂中剂量组;分别将中剂量组药物浓度稀释1倍、浓缩1倍,设为白疕合剂低、高剂量组,给药量均为0.9 mL/(100 g·d)。阿维A组予阿维A溶液0.2 mg/mL灌胃。空白血清组予等量生理盐水灌胃。每日1次,连续7 d。于末次灌胃2 h后腹主动脉采血,2000 r/min离心10 min,分离血清,56 ℃灭活30 min后分装,-20 ℃冻存备用。
2.2 造模
体外培养HaCaT细胞模型。将HaCaT细胞株以1×107/mL接种于含有10%胎牛血清的DMEM培养液及PR-MI1640培养液中,置37 ℃、5%CO2细胞恒温培养箱内贴壁培养。隔日换液1次,倒置显微镜下观察细胞形态 ......
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2.1 分组、给药及药物血清制备
实验大鼠随机分为空白血清组、阿维A组和白疕合剂低、中、高剂量组,每组10只,并单设空白对照组。白疕合剂用药量,成人100 mL/(70 kg·d),按照人与大鼠体表面积比例进行换算,得出大鼠给药剂量为0.9 mL/(100 g·d),以此浓度设为白疕合剂中剂量组;分别将中剂量组药物浓度稀释1倍、浓缩1倍,设为白疕合剂低、高剂量组,给药量均为0.9 mL/(100 g·d)。阿维A组予阿维A溶液0.2 mg/mL灌胃。空白血清组予等量生理盐水灌胃。每日1次,连续7 d。于末次灌胃2 h后腹主动脉采血,2000 r/min离心10 min,分离血清,56 ℃灭活30 min后分装,-20 ℃冻存备用。
2.2 造模
体外培养HaCaT细胞模型。将HaCaT细胞株以1×107/mL接种于含有10%胎牛血清的DMEM培养液及PR-MI1640培养液中,置37 ℃、5%CO2细胞恒温培养箱内贴壁培养。隔日换液1次,倒置显微镜下观察细胞形态 ......
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