安石榴苷在Caco—2细胞的摄取特性研究(2)
2.1.2 标准曲线的制备 精密称取安石榴苷对照品适量，用pH 7.4 Hank's平衡盐缓冲液溶解稀释，得49.6 ?g/mL贮备液。分别吸取贮备液0.5、1、2、4、6、8、10、20 ?L，按上述色谱条件进行分析，外标法进行定量，以安石榴苷峰面积(A)为纵坐标，进样量(?g)为横坐标制备标准曲线。
2.2 安石榴苷在Caco-2细胞的摄取特性
2.2.1 细胞培养 参照文献[4]，将Caco-2细胞培养在T-25培养瓶中，用10%完全培养基(含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素、1%非必需氨基酸等)置37 ℃、5%CO2培养箱中培养。当细胞达到80%～90%融合时，用含0.25%胰蛋白酶将细胞消化下来，1000 r/min离心5 min，弃上清液，加入适当的10%完全培养基调整细胞密度，使细胞以8×104个/cm2接种于24孔板内，24 h后更换培养液，1周内隔日换液，1周后每日换液，培养14 d。
2.2.2 样品处理 参照文献[5]，将细胞从培养箱中取出，用平衡盐溶液轻柔冲洗细胞表面3次，去除细胞表面杂质。再向每个孔内加入1 mL蒸馏水 ......
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2.2 安石榴苷在Caco-2细胞的摄取特性
2.2.1 细胞培养 参照文献[4]，将Caco-2细胞培养在T-25培养瓶中，用10%完全培养基(含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素、1%非必需氨基酸等)置37 ℃、5%CO2培养箱中培养。当细胞达到80%～90%融合时，用含0.25%胰蛋白酶将细胞消化下来，1000 r/min离心5 min，弃上清液，加入适当的10%完全培养基调整细胞密度，使细胞以8×104个/cm2接种于24孔板内，24 h后更换培养液，1周内隔日换液，1周后每日换液，培养14 d。
2.2.2 样品处理 参照文献[5]，将细胞从培养箱中取出，用平衡盐溶液轻柔冲洗细胞表面3次，去除细胞表面杂质。再向每个孔内加入1 mL蒸馏水 ......
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