顽痹清丸HPLC指纹图谱研究(2)
2.2 供试品溶液制备取各批次顽痹清丸适量,研细,取约2.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇40 mL,称定质量,超声处理(功率250 W,频率33 kHz)40 min,放至室温,再称定质量,用70%甲醇补足减失的质量,摇匀,过滤,滤液浓缩并定容至10 mL,用0.45 μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。
2.3 色谱条件
色谱柱:Agilent C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以乙腈为流动相A,0.1%磷酸水溶液为流动相B,按表1进行梯度洗脱;记录时间为77 min;柱温:30 ℃;流速:1.0 mL/min;检测波长:258 nm;进样量:20 μL。
2.4 方法学考察
2.4.1 重复性试验 分别精密称取同一批样品6份,按“2.2”项下方法制备供试品溶液,分别进样,记录指纹图谱。各共有峰的相对保留时间和相对峰面积积分值RSD均<3%,符合指纹图谱要求,表明该方法重复性良好。
2.4.2 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液20 ?L ......
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