新疆阿魏抗肿瘤活性部位筛选(2)
2 实验方法2.1 新疆阿魏不同极性部位的分离
新疆阿魏400 g,用30~60 ℃石油醚2000 mL超声提取40 min,控温在40 ℃以下,相同方法提取1次,过滤,浓缩,60 ℃干燥,至无气泡产生,即得石油醚部位。上述残渣再用95%乙醇2000 mL超声提取2次,过滤,合并提取液,减压浓缩。浓缩的膏液用硅藻土拌样分散均匀后,用乙酸乙酯2000 mL超声提取2次至提取液近无色,减压回收得乙酸乙酯部位;继续用水饱和正丁醇2000 mL超声提取2次至提取液近无色,减压回收得正丁醇部位;用甲醇2000 mL超声提取2次至提取液近无色,减压回收得甲醇部位。
2.2 磺酰罗丹明B法检测
HCT116、HepG2、MFC、Caco-2细胞用加10%胎牛血清的RPMI1640培养基、100 U/mL青霉素和100 mg/mL链霉素在37 ℃二氧化碳培养箱中培养。体外各极性部位对肿瘤细胞增殖作用的测量采用SRB法。取处于对数生长期的HCT116、HepG2、MFC、Caco-2细胞制成细胞悬液,96孔板上每孔加入 ......
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