电针肝俞、足三里对抑郁型功能性消化不良大鼠脑肠相互作用的研究(3)
1.5.4 Western blot检测外侧缰核βCaMKⅡ及海马脑源性神经营养因子蛋白表达 在冰上迅速剥离大鼠大脑,分离出海马和外侧缰核部位。提取大鼠海马与外侧缰核部位蛋白,BCA法进行蛋白定量。各取50 μg蛋白,加上样缓冲液后煮沸5 min,进行SDS-PAGE电泳,然后将蛋白湿转至NC膜,5%脱脂奶粉封闭2 h后,加一抗(稀释比例均为1∶200),4 ℃过夜,用TBST洗膜5次,每次5 min。加相应二抗(按1∶5000稀释),室温孵育2 h,TBST洗膜5次×5 min。经ECL显色,暗室曝光得到X光胶片。应用Image J图像分析软件分析光密度值。采用目的蛋白与内参蛋白条带光密度值的比值作为结果进行分析。1.6 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件进行分析。实验数据以—x±s表示,多组间比较采用方差分析。P<0.01表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 电针对大鼠体质量的影响
实验第14日与空白组比较,其余各组大鼠体质量下降(P<0.01);实验第28日电针组大鼠体质量显著高于模型组(P<0.01) ......
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