糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经p38丝裂素活化蛋白激酶及血浆肿瘤坏死因子—α表达的影响(2)
1 实验材料1.1 动物
6周龄SPF级SD雄性大鼠60只,体质量(160±10)g。许可证号SCXK(京)2004-0009,北京维通利华动物实验中心。北京中医药大学实验动物中心饲养,温度(23±2)℃,湿度(55±10)%,光照12 h,噪音<60 dB,自由摄食饮水,分笼喂养。
1.2 药物与饲料
糖痹康由黄芪、女贞子、桂枝、黄芩、黄连等组成,饮片由北京中医药大学中药学院提供;甲钴胺片,卫材(中国)药业有限公司制造,批号111109A。高脂饲料,北京华阜康生物科技有限公司。
1.3 主要试剂与仪器
TNF-α放射免疫试剂盒(北京华力特生物技术研究所),p38、p-p38为兔来源的单克隆抗体(美国CST公司),辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG、山羊抗小鼠IgG(北京中杉金桥生物技术有限公司)。硝酸纤维素膜(德国Millipore),稳压稳流电泳仪、垂直电泳槽、半干转电转印仪(美国Bio-Rad),电子天平Sartouris(德国BS224S),紫外分光光度计eppendorf(德国Biophotometer)。
2 实验方法
2.1 造模与分组
大鼠适应性喂养1周,随机选取10只为正常组,普通饲料喂养。其余喂高脂饲料,8周后参考文献[1]造模,予STZ 35 μg/g腹腔内注射。72 h后检测尾尖血血糖,血糖水平≥16.7 mmol/L为造模成功。成模大鼠随机分为模型组、甲钴胺组和糖痹康低、中、高剂量组 ......
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