1.7.2 免疫组化检测侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖 大鼠SVZ脑组织切片脱蜡至水，水洗3 min×3次，0.1%Trition/0.1%柠檬酸钠液微波修复；苏木素染核，预冷1 mol/L盐酸孵育10 min，2 mol/L盐酸37 ℃孵育30 min；3%双氧水封闭25 min；滴加Brdu抗体(1∶100)，4 ℃孵育过夜；滴加HRP标记山羊抗小鼠(1∶300)，37 ℃孵育1 h，水洗；DAB显色，脱水，透明，封片。在高倍显微镜下，观察5个不同视野SVZ棕色细胞的数目并记录，即Brdu阳性细胞，以Brdu阳性代表NSCs增殖。计算Brdu阳性细胞率(视野内阳性细胞数÷视野内所有细胞数×100%)。

    1.7.3 实时定量荧光PCR检测c-jun、c-myc mRNA表达 应用Trizol试剂盒提取总RNA，以紫外分光光度计A280、A260定量测定浓度；将总RNA经琼脂糖凝胶电泳鉴定，可见明显的28 s、18 s两条区带，证明其完整性。以组织总mRNA，反转录合成cDNA，60 ℃退火，应用SYBR法进行RT-qPCR。引物序列依次为R-c-myc-S：GAGTCAGGGTCATCCCCATCA，R-c-myc-A：CCAAGACGTTGTGTGTCCGC，扩增长度256 bp；R-c-jun-S：AAACGACCTTCTACGACG ATGC ......