1.6.2 RT-PCR检测 前期研究表明，总RNA样品经琼脂糖凝胶电泳后，紫外灯下观察可见18 s、28 s两条清晰的条带，未被降解。紫外分光比色测定显示，所有RNA样品在260、280 nm处A值之比均在1.8～2.0之间，纯度符合要求，各目标融解曲线均为单一峰，扩增曲线均呈平行分布[7]。总RNA提取，RT-PCR扩增，引物1 μL。MUC5AC上游5'-CTGTGTCCATCT CAACCTTA-3'，下游5'-GCTGCCATCTATCCAATCA-3'，产物长度101 bp；NE上游5'-AATGTGACAGTGG TGACTAA-3'，下游5'-GGCTGCGGATAATGGAAT-3'，产物长度232 bp；β-actin基因为内参，上游5'-CCC ATCTATGAGGGTTACGC-3'，下游5'-TTTAATGTCA CGCACGATTTC-3'，产物长度150 bp。反应条件：94 ℃、10 min，55 ℃、10 s，72 ℃、10 s，共45个循环。CFX-96系统记录PCR反应及数据采集 ......