大黄素对人肝癌HepG2细胞迁移侵袭能力及E—钙黏蛋白、Slug蛋白表达的影响(2)
1 实验材料1.1 细胞
人肝癌HepG2细胞,哈尔滨医科大学第三附属医院消化内科惠赠。
1.2 药物及制备
大黄素购自中国食品药品检定研究院,批号140675-201410。1 mg大黄素溶于200 μL 0.1%二甲基亚砜(DMSO)溶液,溶解后依次加入7.4 mL灭菌三蒸水、50 μL 5 mol/L NaOH溶液,过滤后溶液作为母液,浓度为500 μmol/L,-20 ℃冰箱保存备用,临用时以灭菌三蒸水稀释至所需浓度。
1.3 主要试剂及仪器
5-氟尿嘧啶(5-Fu),上海海普药厂,批号150073; DMSO,徐州试剂二厂,批号150217;牛血清白蛋白(BSA),PAA公司,批号715396;Matrigel基质胶和RPMI-1640培养液,美国HyClone公司;E-cadherin、Slug多克隆抗体,美国ProMab公司;辣根过氧化物酶标记抗鼠IgG二抗 ......
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