黄芩苷对胃癌BGC—823、MGC—803细胞迁移能力的影响(2)
2.5 Western blot检测将对数生长期胃癌MGC-803、BGC-823细胞分为对照组(只加培养液)、LPS组(1000 ng/mL)、黄芩苷(40 μmol/L)+LPS(1000 ng/mL)组干预24 h,加入蛋白裂解液(RIPA∶PMSF=100∶1)提取总蛋白,将蛋白煮沸变性后,经12%SDS-PAGE凝胶电泳将蛋白分离,湿转至PVDF膜上,5%脱脂奶粉封闭1.5 h,一抗(TLR4、AP-1、VEGF、GAPDH)孵育过夜,TBST洗膜3次,二抗孵育2 h,TBST洗膜3次,加入ECL于Bio-rad凝胶成像仪中进行反应,采用Image J软件对Western blot结果进行定量分析,灰度值以累积吸光度值表示,结果以目的蛋白与GAPDH累积吸光度的比值表示。
3 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件进行分析。实验数据以—x±s表示,组间比较采用方差分析。P<0.05表示差异有统计意义。
4 结果
4.1 划痕实验黄芩苷对胃癌MGC-803、BGC-823细胞迁移能力的影响
与对照组比较 ......
您现在查看是摘要页,全文长 4068 字符。