体外高通量评价过敏反应模型的建立及其对潜在过敏原异莲心碱的评价研究(2)
1 实验材料1.1 药物与试剂
重组质粒pmCherry-C1-MrgX2,Genewiz;人胚肾HEK-293细胞,中国科学院精准基因组医学重点实验室;二甲基亚砜(DMSO)培养基和胎牛血清(FBS),Gibco BRL;ATP、G418、C48/80、Probenecid、acid red 1、2-氨基乙氧基联苯硼酸盐(2-APB)及DMEM,Sigma-Aldrich;Matrigel基质,Becton Dickinson;钙离子指示剂Fluo-4/AM,Molecular Probes;96孔黑壁透明底板,Costar;180个中药单体化合物(纯度>98%),中国科学院精准基因组医学重点实验室;CellTiter-Glo?发光法细胞活力检测试剂盒,Promega。
1.2 仪器
FLEX Station Ⅱ荧光成像分析系统,Molecular Devices。
2 实验方法
2.1 稳定细胞系的构建
HEK293细胞于37 ℃、5%CO2孵箱中培养至状态良好 ......
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