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编号:12941271
体外高通量评价过敏反应模型的建立及其对潜在过敏原异莲心碱的评价研究(1)
http://www.100md.com 2016年11月1日 《中国中医药信息》 2016年第11期
体外高通量评价过敏反应模型的建立及其对潜在过敏原异莲心碱的评价研究,MrgX2,过敏反应评价方法,钙流检测
     摘要:目的 建立体外高通量评价过敏反应模型,并对中药单体化合物进行筛选,从而确定其中的潜在过敏原。方法 建立稳定表达MrgX2的高通量药物筛选细胞模型。首先将重组质粒pmCherry-C1-MrgX2转染人胚肾HEK293细胞,通过G418筛选建立稳定表达人MrgX2的细胞株;再通过MrgX2特异性激动剂C48/80和拮抗剂2-APB检测细胞株的功能和稳定性,以Z因子确认高通量体系的稳定性和可靠性。采用上述模型对180个单体化合物进行筛选,以EC50、IC50、特异性及毒性确定该激动剂的功能性。结果 MrgX2细胞模型对特异性激动剂C48/80和特异性拮抗剂2-APB的EC50和IC50分别为2.7 ?g/mL和46.29 ?mol/L,MrgX2细胞模型第1代和第20代对激动剂的反应基本一致,该模型Z因子为0.78 ......
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