麻黄碱和伪麻黄碱的毛细管电泳分离研究(2)
β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、甲基化-β-环糊精,山东滨州智源生物科技有限公司;盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱,中国食品药品检定研究院;磷酸、氢氧化钠、甲醇、乙腈、三羟甲基氨基甲烷(Tris)等均为分析纯,水为去离子水。2 方法与结果
2.1 溶液及样品配制
吸取一定体积的0.1 mol/L磷酸,滴加0.1 mol/L Tris至所需pH,然后加入适量水,得到一定浓度的Tris-磷酸缓冲溶液。取适量添加剂,直接加入上述溶液中,即得到含一定浓度添加剂的缓冲溶液,经过0.45 μm滤膜过滤,再超声脱气15 min后使用。
称取盐酸麻黄碱、酸盐伪麻黄碱适量,用80%甲醇配成终浓度均约为1.00 mg/mL的混合样品。
2.2 毛细管电泳条件
石英毛细管柱总长度为60 cm,有效长度40 cm;温度为室温;检测波长214 nm;虹吸进样,高度10 cm,时间5 s。每日分析前依次用1 mol/L氢氧化钠溶液、水、缓冲液对毛细管进行冲洗,每次分析之间用电泳缓冲液冲洗2 min。
2.3 分离度计算方法
麻黄碱和伪麻黄碱分离度计算:Rs=2(tR2-tR1)/(W1+W2) ......
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