体外实验的优点是适合所有由CYP450代谢的化学物质的代谢研究，排除其他因素干扰，直接观察酶对底物的选择代谢性，为体内实验提供可靠的依据。近年来，体外实验的研究方法主要有肝微粒体孵育法、肝细胞培养法、肝脏组织切片法、原位肝脏灌流法、基因重组P450酶系及微透析法等，各体外实验方法优缺点对比见表1。

    2.2.1 肝微粒体孵育法 微粒体是指在细胞匀浆和差速离心过程中获得的由破碎内质网自我融合形成近似球形的膜囊泡状结构，直径大约100 nm，是异质性的集合体。肝(或其他组织)微粒体体外温孵实验是采用从肝脏(或其他组织)提取的微粒体，加入还原型辅酶Ⅱ(NADPH)再生系统，在体外模拟生理环境进行代谢反应，采用HPLC、HPLC-MS等测定方法对原型药及代谢产物进行测定的一种体外代谢实验方法。有研究将人肝微粒体、各CYP450同工酶底物(2A6-香豆素、2C9-双氯芬酸、3A4-睾酮)及不同浓度的花青素加入NADPH再生系统共同孵育，采用HPLC测定各同工酶底物相应的羟基代谢产物，通过计算Vmax和KM值确定酶的活性，结果显示花青素可抑制CYP2A6、2C9、3A4活性[8] ......