2.2 细胞增殖检测

    取对数生长期HT-29细胞，调整浓度至1×105/mL，接种于96孔板上，每孔100 μL悬液，每组6个复孔，5%CO2、37 ℃孵育24 h，随后依次加入不同浓度的ETS加药培养基(6.25、12.5、25、50、100、200 mg/kg)，对照组加入等体积空白培养基。48 h后弃培养基，加入MTT溶液，5%CO2、37 ℃孵育4 h，加入DMSO溶液，37 ℃溶解10 min，于酶标仪波长570 nm处测定吸光度(OD)，计算细胞抑制率[(1-受试药组平均OD值÷对照组平均OD值)×100%]。

    2.3 细胞核染色

    按“2.1”项方法培养细胞。于6孔板中进行细胞爬片，培养24 h后给药组加入含不同浓度(10、20、40 mg/kg)ETS的1640培养基2 mL，对照组加入等体积1640培养基。培养48 h后，弃培养液，PBS冲洗，4%多聚甲醛0.5 mL固定10 min，PBS冲洗2次，加入Hoechst33258染色液，5 min后PBS冲洗2次，自然晾干，荧光显微镜观察并拍照。

    2.4 细胞凋亡检测

    按 “2.3”项下方法培养细胞。培养48 h后弃培养液，PBS冲洗2次×2 min，加入200 μL Binding Buffer ......