左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马星形胶质细胞神经营养的影响(3)
2.3.4 RT-PCR检测 取大鼠海马按50～100 mg组织/1 mL Trizol加入Trizol，搅碎，静置；按200 μL氯仿/1 mL Trizol比例加入氯仿，室温放置5 min；低温离心15 min取上清液，加入等体积异丙醇，低温高速离心10 min，吸出上层液；按100 μL 75%乙醇/1 mL Trizol比例加入乙醇，悬浮沉淀，低温高速离心5 min，弃上清液，重复1次。干燥5 min，10～25 μL RNasin- free H2O溶解得总RNA。反转录RNA成cDNA，在50 μL cDNA反应液内分别加入2 μL引物(BDNF：5'-GAAACCGTCTAGAGCAATATC-3'，5'-GGTGGAA CTGGATGAAGTACTACC-3'，产物长度142 bp；NGF：5'-CTAAACTTCAGCATTCCCTTGAC-3'，5'-CCCAA CACCATCACCTCCTTG-3'，产物长度153 bp；GDNF：5'-ATTTTATTCAAGCCACCATCAAAAGACTG-3'，5'- CAATAAATATCTTCTCTATATCTCTGTATTTG-3' ......
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