和于泰辅助降糖片联合二甲双胍对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的影响(3)
2.8 Western blot检测取液氮冻存骨骼肌,以RIPA裂解液提取总蛋白,加上样缓冲液100 ℃、5 min蛋白变性;凝胶电泳100 V、1.5 h,预处理PVDF膜及滤纸,半干法转膜15 V、1 h,TBS溶液洗膜10 min;Blocking one/Blocking one-P封闭30 min,一抗(1∶1000稀释)4 ℃孵育过夜,洗膜后二抗(1∶10 000稀释)室温孵育1 h。洗膜,ECL发光液显影,凝胶成像系统成像,蛋白条带用Image J 7.0进行图像分析。
3 统计学方法
采用SPSS 19.0统计软件进行分析。实验数据以—x±s表示,多组间比较采用方差分析,组间比较方差齐用LSD法检验,方差不齐用非参数检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
4 结果
4.1 一般状况
正常组大鼠精神良好,反应灵敏,动作灵活,皮毛光泽;模型组大鼠较正常组体质量显著增加(P<0.01),并出现多饮、多尿、多食、皮毛无光泽;各给药组表现较模型组明显改善 ......
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