健脾活血方对SMMC—7721肝癌裸鼠抑瘤作用的研究(2)
1 实验材料1.1 细胞株和动物
SMMC-7721人肝癌细胞株,南京凯基生物科技发展有限公司;SPF级BALB/c(nu/nu)裸鼠60只,雄性,5~7周龄,体质量18~20 g,南京沐途医疗科技有限公司,动物许可证号SYXK(苏)2016-0010,饲养于南京中医药大学SPF级动物实验室。
1.2 药物及制备
健脾活血方(黄芪30 g,太子参30 g,茯苓10 g,白术10 g,山药10 g,茵陈15 g,薏苡仁30 g,莪术15 g,石打穿15 g,半枝莲15 g),南京中医药大学附属第二医院制剂中心制备,饮片浸泡2 h,煮沸后改文火煎煮15 min,纱布过滤取汁,药渣加水再次煎煮30 min,2次药汁混合,再浓缩并定容;氟尿嘧啶注射液(5-Fu),上海旭东海普药业有限公司,批号1512161。根据人用药剂量结合转换公式计算裸鼠的用药量[2]。
1.3 主要试剂与仪器
DMEM不完全高糖培养液、胎牛血清(FBS)、0.25%胰蛋白酶(Trysin)、磷酸盐缓冲液(PBS) ......
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