健脾消癌方对转化生长因子—β1诱导的SW620细胞上皮间质转化的影响(2)
1 材料与方法1.1 动物
SPF级SD大鼠20只,7~8周龄,雌雄各半,体质量(200±20)g,湖南省长沙斯莱克实验动物中心,动物合格证号SCXK(湘)2016-0002。饲养于温度(20±1)℃、相对湿度50%~70%环境,光照12 h/12 h明暗交替,自由摄食饮水。
1.2 细胞
SW620细胞,中国科学院上海细胞中心,培养于含10%胎牛血清(FBS)、100 U/mL青霉素和链霉素的DMEM(高糖)培养液中,置于37 ℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱内培养。
1.3 主要试剂与仪器
DMEM培养基(GIBCO公司),胎牛血清(GIBCO公司),CCK-8(同仁化学研究所),PrimeScript? RT reagent Kit with gDNA Eraser(Takara),SYBR-Green master(ROCHE),蛋白免疫印迹常规试剂(上海碧云天生物研究公司),E-cadherin、Vimentin一抗(Abcam公司) ......
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