植物多糖分离纯化工艺研究进展(2)
1.2.2 三氯乙酸法蛋白质分子内部的疏水基团能与三氯乙酸发生作用造成蛋白质变性,相互凝聚沉淀。在多糖水溶液中加入等体积的5%~10%三氯乙酸,混匀静置过夜,离心除沉淀,重复操作可得到脱蛋白多糖。崔錾等[10]在冰浴条件下向萝藦果壳多糖溶液中分组加入一定量的三氯乙酸溶液,使三氯乙酸最终浓度为5%、10%、15%,于4 ℃冰箱中过夜,4000 r/min离心15 min,取上清液。结果显示,三氯乙酸浓度为10%时,脱蛋白效果最佳,除蛋白率为71.55%。优点:能有效去除蛋白。缺点:需静置过夜耗时;基于酸水解,在一定程度上水解糖苷键[11]。
1.2.3 酶解法
蛋白酶可催化水解蛋白质,能较温和地去除蛋白。杨斌等[12]比较了三氯乙酸法、Sevage法、木瓜蛋白酶法对蓝刺头多糖除蛋白效果,综合分析显示优化的木瓜蛋白酶法除蛋白效果最佳,除蛋白率、多糖保留率分别为56.57%,98.12%。其最佳工艺为酶解温度64 ℃,时间2.6 h,pH 6.0。特点:作用温和,并能较好地保证多糖的生物活性,且多糖损失率较低[9] ......
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