基于CXCR4启动子的中药有效成分高通量筛选细胞模型构建和应用(2)
1 实验材料1.1 动物
雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,上海中医药大学实验动物中心,动物许可证号SYXK(沪)2014-0008。饲养于上海中医药大学SPF级动物房,自由摄食饮水。
1.2 细胞株
293人胚肾上皮细胞为本实验室培养。
1.3 药物
人参皂苷Rb1和10种候选中药单体均购自上海融禾医药科技发展有限公司。
1.4 主要试剂与仪器
荧光素酶报告载体pGL4.17、海肾荧光素质粒pRL-TK,优宝生物;限制性内切酶Xhol、Hind Ⅲ和T4 DNA连接酶,东洋纺(上海)生物科技有限公司;SuperFectin Ⅱ脂质体转染试剂,上海普飞生物技术有限公司;感受态大肠杆菌DH5α、普通质粒小提试剂盒、胰蛋白胨、琼脂糖及酵母提取物,天根生化试剂有限公司;G418、转化生长因子-β1(TGF-β1) ......
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