蜈蚣败毒饮对银屑病模型小鼠皮肤损伤蛋白质组学表达的影响(2)
2实验方法2.1 小鼠皮肤损伤制备
采用随机方法将K5.Stat3C转基因银屑病小鼠分为空白对照组和蜈蚣败毒饮低、中、高剂量组,每组5只。空白对照组给予生理盐水灌胃,蜈蚣败毒饮低、中、高剂量组给予相应剂量蜈蚣败毒饮药液灌胃。每日灌胃量均为2 mL/100 g,早晚2次,连续8 d。各组小鼠按常规皮肤手术活检取典型皮损,存于冻存管,置于-80 ℃冰箱中保存待用。用TCA/丙酮沉淀+SDT裂解法,收集滤液。用BCA法进行蛋白质定量。分装样品,-80 ℃冰箱保存。
2.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
各样品取蛋白质20 ?g分别加入5×上样缓冲液,沸水浴5 min,进行12%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(恒压250 V,40 min),考马斯亮蓝染色。
2.3 FASP酶解
各樣品取30 μL蛋白质溶液 ......
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