将受孕18 d SD大鼠麻醉后，取胎鼠全脑，解剖镜下夹取海马，去杂质、剪碎后加1∶1胰蛋白酶和Ⅰ型胶原酶消化、离心、重悬、计数，接种于预包被的96孔细胞培养板中(6×10⁴个/孔)，4 h后全量换成维持液(Neurobassal神经元基础培养基∶B27添加剂∶Glutamax∶双抗=96∶2∶1∶1)，3 d后半量换液。培养5 d后，用预冷PBS洗3次，4%多聚甲醛室温固定30 min，清洗后加0.25%TritonX-100溶液作用15 min，再加5%BSA封闭30 min，清洗，滴加兔抗大鼠神经元特异烯醇化酶(NSE)和小鼠抗大鼠β-tublin相关抗原抗体(1∶100)，4 ℃湿盒过夜，清洗，加FITC标记的二抗，37 ℃孵育1 h，清洗，加细胞核染色剂DAPI室温孵育20 min，清洗，最后每孔加入50 μL PBS，用HCA观察分析。

    2.2 药物血清制备

    将SPF级雄性SD大鼠随机分为中药药物血清组、阳性药药物血清组和空白血清组 ......