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编号:13325252
益母草悬浮细胞系的建立及转化外源氢醌生成熊果苷研究(2)
http://www.100md.com 2019年2月1日 《中国中医药信息杂志》 2019年第2期
     熊果苷对照品(批号111951-201301,含量99.6%),中国食品药品检定研究院;氢醌(批号201006131,含量99.0%),四川西亚化工股份有限公司。甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯,水为去离子水。所用材料为湖南中医药大学生物工程实验室前期诱导与筛选出的益母草疏松愈伤组织。

    2方法与结果

    2.1 益母草悬浮细胞系的建立

    取5 g生长旺盛的疏松愈伤组织,接入含100 mL培养液(MS培养基+0.5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+2.0 mg/L 6-苄基嘌呤)的250 mL摇瓶中,转速110 r/min,光照12 h/d,25 ℃培养。按新旧液比为3∶1每隔5 d换液。培养前期每次换液时剔除大的细胞团,待培养至有充分的较小细胞团后,换液时将悬浮细胞液过50目筛,收集滤液,静置片刻待细胞下沉,按新旧液比为3∶1弃去上液并补足新液,继续摇床培养。多次重复,培养一段时间后,建立起益母草悬浮细胞系。此后间歇过50目筛 ......
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