2.4 MTT法检测海马神经元活力

    将海马神经元接种至96孔板中，待细胞生长至5～7 d，随机分为正常组、空白血清对照组、模型组、阳性药药物血清组和加味脑泰方药物血清组，除正常组外，其余各组分别进行缺氧24 h、复氧2 h处理，每组设3个复孔，造模后，每孔加入20 μL MTT，37 ℃孵育4 h，弃上清液，每孔加入150 μL DMSO，于水平摇床上震摇15 min，于酶标仪492 nm波长处测定吸光度(OD)，并计算细胞活力。细胞活力(%)=实验组OD值÷正常组OD值×100%。

    2.5 HCA检测沉默信息调节蛋白1、核因子-κB抑制蛋白、核因子-κB蛋白表达

    将海马神经元接种至96孔板中，待细胞生长至5～7 d，随机分为正常组、空白血清对照组、模型组、阳性药药物血清组和加味脑泰方药物血清组，上述各组细胞进行缺氧24 h、复氧2 h后，弃掉孔内液体，冷0.01 mol/L PBS润洗3次，4%多聚甲醛固定30 min，0.25%Triton-100作用15 min，5%BSA封闭30 min后，加入小鼠抗大鼠β-actin和兔抗大鼠SIRT1、IκBα或NF-κB一抗稀释液(体积比1∶100)，4 ℃避光孵育过夜 ......