2.2 CCK-8检测细胞增殖活力

    细胞5×103个/孔接种于96孔板，每组设立6个复孔，待细胞贴壁后，每组进行相应的处理，药物作用指定时间后，将孔板中原液体吸出，向每孔内加入用基础培养基稀释成含10%CCK-8试剂液，置于37 ℃培养箱中孵育2～3 h，于酶标仪450 nm波长处检测吸光值。

    2.3 细胞衰老β-半乳糖苷酶染色

    待测细胞以2×104个/孔接种于24孔板中，细胞贴壁后，吸除细胞培养液，DPBS洗涤1次，每孔加250 μL β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定15 min，吸除细胞固定液，DPBS洗涤细胞3次，每孔加250 μL染色工作液，置于无CO2、37 ℃培养箱中孵育过夜。倒置光学显微镜下观察并计数，计算蓝染细胞数量占视野内总细胞量的比例。

    2.4 Ad-mRFP-GFP-LC3检测自噬流

    将状态良好的HAECs接种于激光共聚焦显微镜专用培养皿，贴壁24 h后取Ad-mRFP-GFP-LC3腺病毒(病毒滴度为1×107 PFU/mL)在冰上溶解 ......