益肾通淋方对良性前列腺增生大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响(2)
1 材料与方法1.1 动物
SPF级健康雄性SD大鼠60只,体质量为180~220 g,北京维通利华实验动物技术有限公司,动物许可证号SCXK(京)2016-0011。飼养于温度(24±2)℃、相对湿度(50±5)%环境,明暗周期12 h/12 h,自由摄食饮水。
1.2 药物
益肾通淋方(熟地黄15 g、牛膝9 g、黄芪15 g、菟丝子9 g、丹参6 g、土茯苓9 g、金钱草15 g、玉米须15 g、冬瓜子6 g、甘草6 g等),饮片均购自北京中医药大学东直门医院中药房,全方煎煮2次,第1次加10倍量水,第2次加8倍量水,2次煎液合并,浓缩,保存备用;非那雄胺片,杭州默沙东制药有限公司,5 mg/片,批号306713。
1.3 主要试剂与仪器
兔抗鼠p-PI3K、p-Akt、p-mTOR多克隆抗体(英国Abcam),兔抗鼠GAPDH单克隆抗体(美国CST),山羊抗兔二抗(武汉博士德) ......
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