身痛逐瘀汤对人髓核细胞模型PI3K/Akt信号通路Bad、Caspase-9、GSK-3β表达的影响(3)
2.5 人髓核细胞模型超微结构观察分别制作压力组和中药组髓核细胞电镜样本，观察静水压加压前后髓核细胞的超微结构。分别为0.3、1、3 MPa，以模拟人体不同体位下椎间压力环境，每个静水压分别作用2、4、6 h。取出细胞玻片，2.5%戊二醛溶液固定，电镜下观察。
2.6 流式细胞术检测人髓核细胞凋亡
人髓核细胞2000 r/min离心5 min，胰酶消化，收集1×105～5×105细胞，添加500 μL Binding Buffer悬浮细胞，加5 μL Annexin V-FITC混匀后，加5 μL Propidium Iodide，混匀室温、避光、反应5～15 min，1 h內流式细胞仪检测。正常活细胞不被Annexin V- FITC和Propidium Iodide染色;凋亡早期细胞仅被AnnexinV-FITC染色，Propidium Iodide染色呈阴性;坏死细胞和凋亡晚期细胞同时被AnnexinV-FITC和Propidium Iodide染色 ......
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