淫羊藿苷对局灶节段性肾小球硬化模型大鼠泼尼松抵抗的影响(3)
引物序列由宝日医生物技术有限公司合成。Nephrin:上游5’-GCCCAATACACACAGAACGTC-3’,下游5’-CATTCATACTCTGCGTCATCA-3’,扩增产物长度203 bp;Podocin:上游5’-CGACCAGAGGAAGGG ATCA-3’,下游5’-TGGCTTTGGACACATGAGCTA-3’,扩增产物长度378 bp;β-actin:上游5’-GTTGTCCCT GTATGCCTCTG-3’,下游5’-GGAGCCAGGGCAGTA ATCT-3’,扩增产物长度548 bp。用Trizol提取肾组织中总RNA,用反转录试剂盒反转录为cDNA,以其为模板进行PCR扩增,用荧光定量试剂盒进行反应,条件:95 ℃预热7 min,95 ℃变性15 s,60 ℃退火20 s,72 ℃延伸20 s,40个循环,反应结束后制备融解曲线,以β-actin作为内参,用2-?Ct法计算Nephrin、Podocin mRNA相对表达量。1.7 统计学方法
采用SPSS19.0统计软件进行分析 ......
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