基于ISSR分子标记对黑河流域中下游黑果枸杞16个居群的遗传多样性分析(2)
1 仪器与试药PCR扩增仪,德国Biometra;TGL16M型台式高速冷冻离心机,湖南凯达科学仪器有限公司;Gel Doc XRTM紫外光凝胶成像系统,美国Bio-Rad;DYY-7型轉移电泳仪、Biophotometer Plus蛋白核酸定量测定仪,德国Eppendorf公司。
无病虫害的黑果枸杞新鲜幼嫩叶片,放入硅胶中干燥保存[15],样品由甘肃中医药大学晋玲教授鉴定为黑果枸杞Lycium ruthenicum Murr.,样品采集信息见表1。植物DNA提取试剂盒,北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司;试验所用引物均由上海生物工程有限公司合成;PCR扩增所用试剂TaqDNA聚合酶、dNTPs、10×Buffer及提取DNA所用RNA酶,天根生化科技有限公司;Agarose琼脂糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、Tris碱、石英砂、β-巯基乙醇、gold view核酸染料、EDTA、Marker,西安科昊生物工程有限责任公司。
2 方法
2.1 DNA提取与检测
参照文献[15-16]方法适当改良 ......
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