1.7 荧光实时定量PCR检测皮质脑源性神经营养因子、受体酪氨酸蛋白激酶和γ-氨基丁酸受体mRNA表达取样本匀浆20 s，迅速置于冰上，温育5 min，12 000 r/min離心10 min，取上清液，加入氯仿，再离心10 min，取上清液，加异丙醇，离心10 min，弃上清液，沉淀，75%乙醇漂洗2次，7500 r/min离心5 min，加入DEPC水溶解RNA，得RNA溶液，之后进行总RNA中DNA、DNase1的消除，反转录完成后，将其产物进行PCR扩增。以β-actin作为内参，计算2-ΔΔCt值。引物序列见表1。

    1.8 Western blot检测皮质脑源性神经营养因子、酪氨酸激酶受体B和γ-氨基丁酸受体蛋白表达

    组织剪碎，按比例加裂解液(20 mg/150～250 μL)，将匀浆后样品离心，取上清液，根据BCA试剂盒说明书测定蛋白浓度，蛋白质定量贮存于-80 ℃冰箱备用。PAGE胶制备完成后，样品电泳，转膜，转膜完成后封闭，孵育一抗、二抗。最后待膜正面与ECL发光液充分接触后 ......