壮腰通络方对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响
货号,腰痛,1实验材料,1动物,2药物及制备,3主要试剂与仪器,2实验方法,1分组及造模,2给药方法和模型评定,3取材,4指标检测,3统计学方法,4结果,1各组大鼠椎间盘退变程度评估,2壮腰通络方对模型大鼠血清肿瘤
冯蓬 ,朱立国 ,高春雨 ,张威 ,高景华 ,孙凯 ,李路广 ,车颖 ,回瑾1.中国中医科学院望京医院,北京 100020; 2.山东中医药大学,山东 济南 250355
椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是导致盘源性腰痛和其他脊柱退行性疾病的主要原因[1],是大部分脊柱退行性疾病的重要病理基础,往往在MRI影像中被早期识别[2]。国外研究表明,腰痛的终生患病率高达84%,慢性腰痛的患病率约为23%,有11%~12%患者因腰痛致残[3]。随着人们生活方式的改变,腰痛患病率逐年增加且有年轻化趋势,与IDD的病理改变高度相关[4]。
细胞焦亡是细胞程序性死亡的一种方式。越来越多的研究表明,IDD与髓核细胞(NPCs)焦亡相关,肿瘤坏死因子(TNF)-α及其进一步激活的核因子(NF)-κB信号通路可能是NPCs焦亡的中心环节[5]。在退变的NPCs中,TNF-α、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶(Caspase)-1、白细胞介素(IL)-1β表达显著上调,其水平能够反映NPCs的焦亡程度[6]。焦亡的髓核组织进一步释放炎性介质,诱导炎性细胞浸润,引发炎症级联反应[7]。抑制NLRP3激活可以减少细胞外基质降解,对NPCs起到保护作用,从而缓解IDD。
壮腰通络方是朱立国教授在《外台秘要》腰痛类方的证治特点及用药规律基础上总结而成[8],具有补益肝肾、活血通络作用,用于治疗脊柱退行性疾病所致腰痛及腰椎功能障碍,临床应用多年,疗效显著[9]。实验研究发现,该方能降低腰椎间盘退行性病变大鼠血清炎症因子水平,增加椎间盘组织NPCs数量[10]。本研究观察壮腰通络方对IDD大鼠NPCs焦亡的影响,进一步探究其延缓IDD的作用机制。
1 实验材料
1.1 动物
8周龄SPF级雄性SD大鼠48只,体质量(200±20)g,购于中国食品药品检定研究院,动物生产许可证号SCXK(京)2017-0005。饲养于中国中医科学院中医基础理论研究所动物房,通风良好,温度20~25 ℃,湿度40%~50%,12 h/12 h光暗交替,自由摄食饮水,动物使用许可证号SYXK(京)2021-0017。本实验经北京隆安实验动物中心伦理委员会审批(BJLongan-L-L-003)。
1.2 药物及制备
壮腰通络方由杜仲、熟地黄、当归、丹参、延胡索、独活、川芎、秦艽、牛膝按15∶15∶12∶12∶10∶10∶10∶12∶12比例组成 ......
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