倪钰莹，范淑月，崔颖，高婧，罗再奕，刘敏

    北京中医药大学，北京 100029

    变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)是由IgE介导、Th2细胞驱动、针对吸入性变应原反应引起的鼻黏膜炎症性疾病[1]。诱发AR的因素主要有尘螨、花粉、霉菌等[2]。鼻黏膜上皮细胞是抵御病原体入侵和过敏原渗透的第一道生理屏障。紧密连接位于上皮细胞顶端，参与细胞旁运输的调节，对维持上皮屏障功能具有关键作用[3]。上皮屏障受损可以促进上皮细胞的旁转运，增加变应原渗入，诱导IgE产生，触发肥大细胞脱颗粒，从而导致AR发生发展[4]。RhoA/ROCK信号通路参与调节多种细胞功能，如细胞收缩、黏附、迁移等[5]。RhoA/ROCK通路激活可以诱导细胞周围F-肌动蛋白(F-actin)细胞骨架的动态重组和收缩，改变紧密连接的结构和功能，增加细胞旁通透性[6]。因此，保护上皮细胞屏障功能以减少变应原渗入可能是防治AR的重要策略。

    AR属中医学“鼻鼽”“鼽嚏”等范畴，病机多为肺经感寒、肾阳虚衰。麻黄细辛附子汤出自《伤寒论》，由麻黄、细辛、附子组成，有散寒通窍、温阳固表之效，对防治AR效果显著[7-8]。麻黄轻扬发散，善宣肺气、开腠理、透毛窍，是治疗AR常用药。课题组前期研究发现，麻黄细辛附子汤在AR适应性免疫方面，可以调控T细胞细胞因子和转录因子表达，逆转Th2偏移，恢复Th1/Th2动态平衡[9-10]；在固有免疫方面，可以下调树突状细胞抗原提呈能力[11-12]，抑制2型固有淋巴细胞功能发挥[13]。此外，在麻黄细辛附子汤及其拆方干预T细胞研究中发现，麻黄单用也具有显著免疫调节作用[9]。本实验通过尘螨变应原Der p1诱导鼻黏膜上皮细胞屏障损伤，进一步探讨麻黄细辛附子汤及麻黄的屏障保护作用及其潜在机制，为临床治疗AR提供实验依据。

    1 实验材料

    1.1 细胞

    人鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)由北纳生物提供，货号356247。

    1.2 药物及制备

    麻黄细辛附子汤由麻黄、细辛、附子按6∶3∶9比例组成，饮片购于北京仟草中药饮片有限公司。常规方法煎煮，浓缩，制成1 g/mL水煎液，4 ℃、12 000×g离心30 min，收集上清液，0.22 μm滤器过滤后置于-20 ℃冰箱保存备用。称取适量麻黄，同法制成1 g/mL麻黄水煎液，离心，过滤后于-20 ℃冰箱保存备用。

    1.3 试剂与仪器

    MEM培养基(上海逍鹏生物公司，货号C3050) ......