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编号:478671
基于IL-6/miR-155轴探讨溃结宁膏穴位敷贴对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠的影响
http://www.100md.com 2023年10月17日 中国中医药信息杂志 2023年第10期
批号,1材料与方法,1动物,2药物,试剂及仪器,3造模,4分组及给药,5取材,6指标检测,7统计学方法,2结果,1溃结宁膏对模型大鼠一般状况及疾病活动指数评分的影响,2溃结宁
     陈凯,朱莹,周牧之

    湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007

    溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)主要临床特征包括大便带血、腹部疼痛,以及大便形状、质地等改变。肠黏膜损伤和溃疡形成是UC常见病理表现,好发于直肠与乙状结肠,也可延伸至降结肠甚至整个结肠[1]。UC在我国发病率逐年升高[2-3],常用药物有5-氨基水杨酸、激素、生物制剂及免疫调节剂,约一半患者服药后症状有效缓解,但可能导致严重不良反应,如呕吐、贫血和全身水肿等。由于UC病因复杂、复发风险高,易伴发其他并发症,已成为临床亟需解决的难题。UC发病机制复杂,具体原因尚未完全明确。IL-6/miR-155轴在UC发生发展中发挥重要作用,白细胞介素(IL)-6通过作用于下游信号因子促进信号传导与转录激活因子(STAT)3磷酸化,STAT3磷酸化入核后能诱导miR-155表达,进一步调控UC炎症反应及Th17/Threg平衡[4-6]。溃结宁膏是朱莹教授根据多年临床经验所创,课题组运用溃结宁膏穴位敷贴治疗脾肾阳虚型UC临床疗效显著[7]。前期实验研究表明,溃结宁膏能减轻UC大鼠及细胞模型炎症反应,降低肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1等促炎因子分泌[8-9]。本实验在前期研究基础上,观察溃结宁膏穴位敷贴对UC大鼠炎症反应及Th17/Threg平衡的影响,进一步阐明其治疗UC的分子机制,为临床应用提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF级雄性SD大鼠60只,体质量180~220 g,购于湖南斯莱克景达实验有限公司。饲养于湖南中医药大学第一附属医院动物房,温度20~25 ℃,湿度40%~70%,12 h光暗循环,自由摄食饮水。本实验经湖南中医药大学第一附属医院实验动物伦理委员会批准(ZYFY20190814-1)。

    1.2 药物、试剂及仪器

    溃结宁膏(由炮附子、延胡索、丁香、芥子、赤芍、细辛、生姜按1∶1∶1∶1∶1∶1∶2组成)、无药物巴布剂基质(由聚丙烯酸钠、高岭土、明胶、甘羟铝、聚乙烯醇、蓖麻油、甘油组成),湖南省中医院药剂科提供。柳氮磺嘧啶(SASP)片,批号09190501,上海信谊天平药业有限公司。番泻叶,湖南然润堂中药有限公司。

    2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS,批号2297,美国Sigma公司),腺嘌呤(批号A8626-25G,美国Sigma公司),大便隐血试剂(批号C027-1-1,珠海贝索生物技术有限公司),IL-8、IL-17、IL-23 ELISA试剂盒(批号分别为I03050436、I0303471、I040347110 ......

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