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编号:218220
银屑病基因差异化表达研究
http://www.100md.com 2012年5月30日 中国疗养医学 2012年第7期
基因芯片,杂交,1材料与方法,2结果,3讨论
     杨积顺 徐立平

    (解放军第100医院药械科,215007)

    银屑病是常见的慢性复发性皮肤病,其发病机制仍不清楚。基因芯片,又称基因微阵列,是将大量的靶基因DNA片段以及不同长度的寡核苷酸高密度、有序地排列在硅片及合金片等固相物质上。该技术已广泛应用于基因表达图谱分析、肿瘤分子分型、基因诊断、基因突变、新药研发等方面,且具有背景噪音低、重复性好、系统误差小等优点。银屑病发病机制中的重要相关基因还有待进一步的明确,因此,本研究采用现代基因芯片技术,通过使用随机方差模型,筛选出银屑病病人及健康人皮肤中显著性差异基因,试为揭示银屑病发病机制及药物研究提供科学的理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 皮肤组织来源 银屑病病人皮损组织3例,来源于皮肤科门诊,年龄(32.25±4.36)岁,部位为病人腹部皮肤;健康人皮肤组织3例,来源于医院整形科门诊,年龄(37.34±4.16)岁,取材部位为腹部皮肤。银屑病皮肤样本由病理科组织病理学确认,3例银屑病病人入组前均未患其他皮肤性疾病,且未进行过局部或系统性药物治疗。所有参加本研究的志愿者均签署知情同意书。

    1.2 试剂 总RNA抽提采用Invitrogen公司的试剂盒;无RNA酶的糖原(Invitrogen公司);cRNA标记与合成采用TrueLabeling-AMPTM线性RNA扩增试剂盒和SuperArray Array-Grade cRNA 纯 化 试 剂 盒(货 号 :GA-012);Biotin-16-dUTP(Roche Cat.No.1-093-070);GEAhyb杂交液 (SuperArray Bioscience);化学发光检测试剂盒Chemiluminescent Detection Kit(SuperArray Bioscience ......

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