韩毅 彭浩

    两种方法检测LGC盲样及效果探讨

    韩毅 彭浩

    目的 检测LGC盲样中的小肠结肠炎耶尔森氏菌并对过程和结果进行探讨。方法 ①分离培养法。②实时荧光PCR法。结果 两者均检出小肠结肠炎耶尔森氏菌。结论 两种方法的有效结合对目标菌检出有更重要的意义。

    盲样；小肠结肠炎耶尔森氏菌；分离培养法；实时荧光PCR法

    小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种人兽共患的肠道病原菌，20世纪80年代才受到人们的重视，不少地区耶氏菌引起的胃肠炎和严重腹泻，比痢疾还多。1981年我国才发现此病，通过全国性调查和研究，发现其在我国的分布非常广泛，80年代中期证实过曾有两次大流行[1]。本菌是一种嗜冷菌，在0～4℃仍能继续繁殖并产生毒素。在冰箱内存放的污染该细菌的食品对人仍具有感染性[2]。鉴于小肠结肠炎耶尔森氏菌的危害性，很多国家都已将该菌列为食品的常规检测项目。本检测中心为了提高中心实验室的小肠结肠炎耶尔森氏菌检测能力，向英国LGC申请该菌的国际盲样考核，并通过常规鉴定法和PCR法对该盲样进行了实验。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源 英国LGC(Laboratory of the Government Chemist政府化学家实验室)提供的冻干粉25 g。

    1.2 培养基、试剂及仪器

    1.2.1 分离培养法的培养基、试剂及仪器 改良磷酸盐缓冲液(PSB)、CIN-1培养基、改良Y培养基、改良克氏双糖培养基、尿素酶、动力半固体、糖发酵管由北京陆桥试剂有限公司提供；API鉴定系统、API-20E生化试剂条及其配套试剂，VITEK2全自动细菌鉴定仪及VITEK2-GN鉴定卡购自法国梅里埃公司 ......