重组人生长激素稳定性研究进展(2)
毛细管电泳(HPCE)、质谱、凝胶电泳等法。检测目的主要包括等电点测定(CIEF技术)、分子量测定(SDS—PAGE和SDS—CGE)、稳定性研究(HPCE辅以基质辅助激光解吸质谱法)、氨基酸组成分析(Edman酶解、化学降解法或直接多肽特异酶解后经HPCE和HPLC分离进入氨基酸自动分析仪进行序列测定)以及结构分析(质谱、核磁共振、傅立叶红外转换光谱、圆二柱色谱)等。
4.1 高效液相色谱
HPLC法是检测多肽组分含量、纯度最常用和最成熟的一种方法。其中，反相色谱柱对多肽类药物的分析占高效液相色谱分析的80%以上。
4.2 毛细管电泳
HPCE主要用于多肽纯度的鉴定。与HPLC法相比，HPCE具有更高的分辨率和灵敏度，某些纯化的多肽在凝胶电泳和HPLC上鉴定纯度为100%，但用HPCE分析纯度仅90%。同时，HPCE法的进样量也更少。
4.3 DSC热差分析仪
使用热差分析仪可对蛋白质药物的热稳定性进行分析。
4.4 快原子轰击质谱
快原子轰击质谱是准确测定多肽物质分子量的有效方法。由于不易获得碎片峰，其在测定多肽顺序上有困难，应用串联质谱可解决这一问题。通过快原子轰击质谱确定多肽分子量，在此基础上通过活化碰撞(CA)技术可对氨基酸序列进行识别。
4.5 电喷雾电离质谱
电喷雾电离质谱依靠强电场使分子电离。电喷雾技术与串联质谱联用，不仅能测定生物分子的分子量，而且能确定多肽和蛋白质的序列信息。
4.6 基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱技术
基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱技术具有操作简单、灵敏度高、质量分辨率高和测定质量范围宽等特点，非常适合生物分子和高聚物的分子量测定。
4.7 核磁共振
核磁共振(NMR)可用于确定氨基酸序列，并可对混合物中的各组分含量进行分析。
5 结语
目前，对rhGH的研究主要集中在剂型的改良和稳定性研究上。随着科技的进步，更加精密的检测仪器的出现必将加速这一研究进程。未来研究方向可以分为几个方面：1)聚乙二醇化rhGH的制备、纯化、理化性质以及生物活性研究；2)金属离子稳定rhGH机理的研究；3)rhGH液体制剂的开发和稳定性研究；4)采用生物可降解材料开发rhGH控释、缓释剂型的研究。
共2页, 百拇医药(燕方龙 李洪森 王金龙 高辰婷 倪 俊)
4.1 高效液相色谱
HPLC法是检测多肽组分含量、纯度最常用和最成熟的一种方法。其中，反相色谱柱对多肽类药物的分析占高效液相色谱分析的80%以上。
4.2 毛细管电泳
HPCE主要用于多肽纯度的鉴定。与HPLC法相比，HPCE具有更高的分辨率和灵敏度，某些纯化的多肽在凝胶电泳和HPLC上鉴定纯度为100%，但用HPCE分析纯度仅90%。同时，HPCE法的进样量也更少。
4.3 DSC热差分析仪
使用热差分析仪可对蛋白质药物的热稳定性进行分析。
4.4 快原子轰击质谱
快原子轰击质谱是准确测定多肽物质分子量的有效方法。由于不易获得碎片峰，其在测定多肽顺序上有困难，应用串联质谱可解决这一问题。通过快原子轰击质谱确定多肽分子量，在此基础上通过活化碰撞(CA)技术可对氨基酸序列进行识别。
4.5 电喷雾电离质谱
电喷雾电离质谱依靠强电场使分子电离。电喷雾技术与串联质谱联用，不仅能测定生物分子的分子量，而且能确定多肽和蛋白质的序列信息。
4.6 基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱技术
基质辅助的激光解吸电离飞行时间质谱技术具有操作简单、灵敏度高、质量分辨率高和测定质量范围宽等特点，非常适合生物分子和高聚物的分子量测定。
4.7 核磁共振
核磁共振(NMR)可用于确定氨基酸序列，并可对混合物中的各组分含量进行分析。
5 结语
目前，对rhGH的研究主要集中在剂型的改良和稳定性研究上。随着科技的进步，更加精密的检测仪器的出现必将加速这一研究进程。未来研究方向可以分为几个方面：1)聚乙二醇化rhGH的制备、纯化、理化性质以及生物活性研究；2)金属离子稳定rhGH机理的研究；3)rhGH液体制剂的开发和稳定性研究；4)采用生物可降解材料开发rhGH控释、缓释剂型的研究。
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