双水相体系与超声集成提取月季花总黄酮(2)
2.5.2 正交试验
综合单因素试验结果，以料液比(A)、醇水比(B)、提取时间(C)和(NH4)2SO4浓度(D)4因素进行超声提取-双水相分离，每个因素设3个水平，做L9(34)正交试验，因素水平见表1，正交试验结果见表2，方差分析结果见表3。
由表2、3可知，各因素对总黄酮提取率影响程度由大到小依次为：A>B>D>C，即料液比>醇水比>(NH4)2SO4浓度>提取时间，其中料液比和醇水比对提取率有显著性影响(P<0.05)，最终确定最佳提取条件为A3B1C2D1，即用醇水比0.6的乙醇做提取溶剂，料液比1：50，(NH4)2SO4浓度0.27 g/ml的条件下超声50 min。
2.6 验证实验
取月季花药材粉末1.0 g，共5份，精密称定，按正交试验选取的最佳工艺提取制备样品，按2.3项下方法测定吸光度，计算得总黄酮平均提取率为4.42%，RSD为1.2%。
3 讨论
将本法确定的最佳提取工艺与乙醇-水回流提取法进行比较研究，乙醇-水回流提取法条件为：60%的乙醇溶液，料液比1：50，回流提取2 h。结果月季花总黄酮提取率为4.42%，乙醇-水回流提取法为3.89%。本法总黄酮提取率高于乙醇-水回流提取法，且提取温度低，所需时间较短，提取分离同时进行，操作简便，明显优于乙醇-水回流提取法，可为月季花总黄酮的分离纯化及开发利用提供有益参考。
参考文献
[1]张曦，吴锡信.月季花的药理及临床应用探讨[J].吉林中医药，2004，24(4)：47.
[2]崔山风.槲皮素的研究进展[J].西北药学杂志，2006，21(6)：279-281.
[3]张沛，薛莹，青琳森，等.月季花的化学成分研究[J].中草药，2010，41(10)：1616-1618.
[4]王浩江，孙体健，曹晓峰.月季花中总黄酮含量测定[J].山西医科大学学报，2007，38(4)：318-319.
[5]徐文昭.月季花花瓣的黄酮类成分的研究[J].南京中医药大学学报，2000，16(4)：225-226.
[6]吴敏.双水相萃取技术在药物提取与分离中的应用[J].中成药，2006，28(10)：1505-1508.
[7]董树国，赖红伟，陆钊，等.双水相萃取在黄酮类化合物分离分析中的应用[J].广州化工，2009，37(7)：43-44.
[8]王志辉，朱建航，郑楠，等.葛根素在乙醇/硫酸铵两水相体系中的分配特性[J].时珍国医国药，2008，19(1)：13-15.
[9]高云涛，吴立生，王伟.丙醇-硫酸铵-水液-液体系萃取分离铂、钯、铑和金[J].分析化学，2001，29(8)：901-903.
[10]许灵君，欧阳玉祝，吴道宏，等.双水相体系协同超声提取法分离金银花总黄酮[J].食品与发酵科技，2010，46(6)：93-96.
(收稿日期：2011-10-26), 百拇医药(张敏娜 朱军 王光辉 王汀 丁瑞芳 张华丽)
综合单因素试验结果，以料液比(A)、醇水比(B)、提取时间(C)和(NH4)2SO4浓度(D)4因素进行超声提取-双水相分离，每个因素设3个水平，做L9(34)正交试验，因素水平见表1，正交试验结果见表2，方差分析结果见表3。
由表2、3可知，各因素对总黄酮提取率影响程度由大到小依次为：A>B>D>C，即料液比>醇水比>(NH4)2SO4浓度>提取时间，其中料液比和醇水比对提取率有显著性影响(P<0.05)，最终确定最佳提取条件为A3B1C2D1，即用醇水比0.6的乙醇做提取溶剂，料液比1：50，(NH4)2SO4浓度0.27 g/ml的条件下超声50 min。
2.6 验证实验
取月季花药材粉末1.0 g，共5份，精密称定，按正交试验选取的最佳工艺提取制备样品，按2.3项下方法测定吸光度，计算得总黄酮平均提取率为4.42%，RSD为1.2%。
3 讨论
将本法确定的最佳提取工艺与乙醇-水回流提取法进行比较研究，乙醇-水回流提取法条件为：60%的乙醇溶液，料液比1：50，回流提取2 h。结果月季花总黄酮提取率为4.42%，乙醇-水回流提取法为3.89%。本法总黄酮提取率高于乙醇-水回流提取法，且提取温度低，所需时间较短，提取分离同时进行，操作简便，明显优于乙醇-水回流提取法，可为月季花总黄酮的分离纯化及开发利用提供有益参考。
参考文献
[1]张曦，吴锡信.月季花的药理及临床应用探讨[J].吉林中医药，2004，24(4)：47.
[2]崔山风.槲皮素的研究进展[J].西北药学杂志，2006，21(6)：279-281.
[3]张沛，薛莹，青琳森，等.月季花的化学成分研究[J].中草药，2010，41(10)：1616-1618.
[4]王浩江，孙体健，曹晓峰.月季花中总黄酮含量测定[J].山西医科大学学报，2007，38(4)：318-319.
[5]徐文昭.月季花花瓣的黄酮类成分的研究[J].南京中医药大学学报，2000，16(4)：225-226.
[6]吴敏.双水相萃取技术在药物提取与分离中的应用[J].中成药，2006，28(10)：1505-1508.
[7]董树国，赖红伟，陆钊，等.双水相萃取在黄酮类化合物分离分析中的应用[J].广州化工，2009，37(7)：43-44.
[8]王志辉，朱建航，郑楠，等.葛根素在乙醇/硫酸铵两水相体系中的分配特性[J].时珍国医国药，2008，19(1)：13-15.
[9]高云涛，吴立生，王伟.丙醇-硫酸铵-水液-液体系萃取分离铂、钯、铑和金[J].分析化学，2001，29(8)：901-903.
[10]许灵君，欧阳玉祝，吴道宏，等.双水相体系协同超声提取法分离金银花总黄酮[J].食品与发酵科技，2010，46(6)：93-96.
(收稿日期：2011-10-26), 百拇医药(张敏娜 朱军 王光辉 王汀 丁瑞芳 张华丽)