姜黄素对大鼠肝纤维化防治作用(2)
取材8周后处死大鼠,留取大鼠全血,并分离出血清,-7 ℃保存待测;留取肝左叶浸泡于10%中性甲醛溶液中固定至少24 h待检。
检测方法
比色法检测血清活性氧(ROS)水平;鲎试验法检测血清内毒素;TBA法检测肝组织匀浆中丙二醛(MDA)含量;电泳迁移率试验(EMSA)检测肝组织中对肝组织核因子-kB(NF-kB)的活性,结果用图像分析软件Image Plus进行条带灰度面积分析,计算NF-kB活性值(灰度值);免疫组织化学双染色检测肝组织中NF-kB和肌源性特异性标志物结合蛋白(desmin),确定NF-kB在肝星状细胞的表达;免疫组织化学法检测肝组织中转化生长因子-b1(TGF-b1)、血小板衍生长因子-BB(PDGF-BB)、CTGF水平;RT-PCR法检测肝组织中金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的mRNA水平。
统计学处理
采用SPSS 13.0软件分析数据。数据以(±s)表示,组间比较用单因素方差分析,P<0.05为差异有显著性意义。
结果
血清ROS水平
经四氯化碳造模后模型组血清ROS水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);给予姜黄素后,ROS水平下降 ......
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