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编号:12597224
脑蛋白水解物原料肽含量测定方法的改进(2)
http://www.100md.com 2015年7月1日 上海医药 2015年第13期
     16种氨基酸对照品溶液的配制

    对照品溶液的制备:称取16种氨基酸对照品各约30 mg,至100 ml容量瓶中,以0.04 mol/L盐酸溶液溶解至刻度(对照品贮备液),再精密量取2 ml,至10 ml容量瓶中用水稀释至刻度,摇匀,备用。

    供试品溶液的配制

    游离氨基酸含量测定供试品溶液:精密称重脑蛋白水解物原料300 mg,置100 ml容量瓶中,加水溶解并超声10 min,加水稀释至刻度,滤过,取续滤液作为游离氨基酸含量测定供试品溶液。

    水解氨基酸含量测定供试品溶液:精密称取脑蛋白水解物原料200 mg,置硬质安瓿中,加盐酸2 ml,摇匀,充氮封口,于110 ℃水解20 h,放冷,启封后溶液置蒸发皿中,水浴蒸发至干,加水使残留物溶解并稀释至100 ml,作为水解氨基酸含量测定供试品溶液。

    衍生化程序

    采用Agilent液相色谱仪自带的柱前衍生的方法,设定进样程序,对所得的氨基酸样品进行衍生化反应,进样器程序设定见表2。

    氨基酸衍生试剂配制方法:

    小瓶 1:8 mg/ml邻苯二甲醛(OPA)溶液:精密称取80 mg邻苯二甲醛(OPA) ......
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