组织芯片技术用于检测120例胃腺癌患者E-cadherin、CEA和HER-2表达的临床意义(2)
1.2 组织芯片设计和制作
根据观察组及对照组所选标本数，每例取2个组织芯片，每个含有60例胃腺癌和13例正常组织，共做成4个组织芯片。预先制作4个受体模块，大小为25 mm×25 mm×20 mm，孔径10 mm，排成12×7点组织微列阵。将选取标本重新切片，HE染色。再在组织蜡块上准确标记所需的靶点。用穿刺针将标记好的供体组织取出组织芯，转移到受体模块相应的位置，将制成的组织芯片蜡块面朝下放在铜板上，并轻压蜡块使组织芯片排平，冷却后再放连续切片，厚约4 μm，捞片后于58 ℃过夜，置于冰箱储存备用。
1.3 观察指标
采用免疫组化PV-6000二步法检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和癌胚抗原(CEA)水平，试剂盒购自广州深达公司；荧光原位杂交技术检测人表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增，探针购自北京金菩嘉。检测方法严格按照说明书操作，1.4 判定指标
免疫组化染色结果判定标准参照文献[1]。染色强度评分：无着色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。阳性率评分：0%为0分，<5%为1分，5～50%为2分，>50%为3分。染色结果根据染色强度和阳性率分数相加所得积分，其中阴性(-)：≤2分、阳性(+)：3～4分 ......
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根据观察组及对照组所选标本数，每例取2个组织芯片，每个含有60例胃腺癌和13例正常组织，共做成4个组织芯片。预先制作4个受体模块，大小为25 mm×25 mm×20 mm，孔径10 mm，排成12×7点组织微列阵。将选取标本重新切片，HE染色。再在组织蜡块上准确标记所需的靶点。用穿刺针将标记好的供体组织取出组织芯，转移到受体模块相应的位置，将制成的组织芯片蜡块面朝下放在铜板上，并轻压蜡块使组织芯片排平，冷却后再放连续切片，厚约4 μm，捞片后于58 ℃过夜，置于冰箱储存备用。
1.3 观察指标
采用免疫组化PV-6000二步法检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和癌胚抗原(CEA)水平，试剂盒购自广州深达公司；荧光原位杂交技术检测人表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增，探针购自北京金菩嘉。检测方法严格按照说明书操作，1.4 判定指标
免疫组化染色结果判定标准参照文献[1]。染色强度评分：无着色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。阳性率评分：0%为0分，<5%为1分，5～50%为2分，>50%为3分。染色结果根据染色强度和阳性率分数相加所得积分，其中阴性(-)：≤2分、阳性(+)：3～4分 ......
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